Técnica Molecular Epigenómica en la Neumonía Neimocóccica (PCR de miRNAs)

Tema: miRNA-302e atenúa la inflamación en la neumonía a través de la vía de señalización RelA / BRD4 / NF-κB

Objetivo: investigar el papel del microARN (miARN) -302e en la neumonía infantil (IP) y explorar los posibles mecanismos de protección.

Muestra: Tejido pulmonar.

Tipo de Ácido nucleico: miRNA-302e.

Gen o secuencia a amplificar: chip de genes para la expresión de miR y ( G) reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa para la expresión de miRNA-302e

Tipo de PCR:  RT-qPCR

Pasos en las condiciones de almacenaje:
Las muestras de tejido pulmonar fijadas con paraformaldehído se incluyeron en parafina y se almacenaron a 4 ° C. Las muestras de tejido pulmonar se cortaron en secciones de 10 μm utilizando una máquina de corte de parafina (RM2235; Leica Microsystems GmbH, Wetzlar, Alemania), se tiñeron con hematoxilina y eosina durante 10 minutos a temperatura ambiente y se observaron bajo microscopía óptica (aumento, x 100; BH3-MJL; Olympus Corporation, Tokio, Japón).

Para investigar los roles de los miRNAs en un modelo de ratón de IP, se analizaron los cambios de los miRNAs. Los niveles de TNF-α, IL-1β, IL-6 e IL-18 aumentaron significativamente en el modelo de ratón de IP en comparación con los ratones simulados (P <0.01; Fig. 1A-D ). La tinción con H&E demostró que los alvéolos pulmonares se redujeron en el modelo de ratón de IP, en comparación con los ratones simulados. Estos resultados de tinción de H&E, TNF-α, IL-1β, IL-6 e IL-18 indicaron que el modelo in vivo se estableció con éxito. Además, la expresión de miRNA-302e disminuyó significativamente en un modelo de ratón de IP en comparación con el grupo simulado (P <0,01; Fig. 1F-G ). Por lo tanto, miRNA-302e puede estar involucrado en la inflamación en la IP.
En conclusión, el presente estudio demuestra que se redujo la expresión de miRNA-302e en modelos IP de ratones. miRNA-302e atenúa la inflamación en IP a través de la vía de señalización RelA / BRD4 / NF-κB. Estos resultados revelan un nuevo papel antiinflamatorio del miRNA-302e en los mastocitos activados, lo que sugiere que miR-302e puede ser un objetivo terapéutico prometedor para el tratamiento de la PI.

Referencías Bibliográficas.-

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